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技術(shù)文章

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  • 轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒?yàn)的效率

    2022-11-30 轉(zhuǎn)染是一種將外來顆粒和核酸轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中的技術(shù),它可以通過化學(xué)的方式來實(shí)現(xiàn)。轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒?yàn)的效率,從而可以在應(yīng)用基因和基因組令人難以置信的功能領(lǐng)域進(jìn)行大量研究。在所有轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中,轉(zhuǎn)染方式的選擇尤為重要。陽離子聚合物與帶負(fù)電荷的核酸序列結(jié)合,帶正電荷的復(fù)合物被細(xì)胞膜吸引并通過內(nèi)吞作用整合到宿主細(xì)胞中。此類試劑包括PLGA(聚乳酸-乙醇酸共聚物),一種可安全用于轉(zhuǎn)染程序的食品級(jí)聚合物,以及PBAE(聚-β-氨基酯),一種能夠保護(hù)DNA分子的聚合物在宿主細(xì)胞內(nèi)遞送。這些從P...
  • 微生物的培養(yǎng)方法步驟介紹

    2022-11-29 微生物培養(yǎng)所培養(yǎng)的微生物通常是病菌、細(xì)菌、放線菌、真菌等,屬于生物培養(yǎng)的一種。微生物培養(yǎng)步驟:1.配置不同濃度的營養(yǎng)液稀釋液:取營養(yǎng)液1ml溶于9ml無菌水中,振蕩5min配成10%的溶液.2.將容器口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.3.將試管口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養(yǎng)皿中,在各培養(yǎng)皿上標(biāo)...
  • 蛋白酶K的性質(zhì)從這三個(gè)方面介紹

    2022-11-27 蛋白酶K來源于林伯氏白色念球菌(TritirachiumalbumLimber),是一種與枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶。由于它能降解角蛋白(keratin),因此被命名為蛋白酶K。它是一種高活性的廣譜蛋白酶,在變性劑尿素或十二烷基磺酸鈉(sodiumdodecylsulfonate,SDS)溶液中依然能保持較高酶活力,所以被廣泛應(yīng)用于各種生物材料中的DNA或RNA的提取。蛋白酶K的性質(zhì)從這三個(gè)方面介紹:一、分子結(jié)構(gòu)蛋白酶K由一條肽鏈組成,包含277個(gè)氨基酸殘基,相對(duì)分子質(zhì)...
  • 高保真DNA聚合酶的定義及如何選擇

    2022-11-08 DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中*組成部分,是參與DNA復(fù)制中的重要酶,被用在生物及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的各個(gè)研究方向上。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時(shí)間里,從早期被發(fā)現(xiàn)的TaqDNA聚合酶到現(xiàn)在,酶越來越多樣化。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對(duì)舊酶的改造,DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進(jìn)。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應(yīng)了市場需求,下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應(yīng)用方向等進(jìn)行介紹。一、什么是什么是高保真酶高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心,聚合中心具有5'→3...
  • 李記生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常見問題(一)

    2022-11-07 涉及產(chǎn)品EZTransPlus細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(Ⅱ)貨號(hào):AC04L011EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(高效)貨號(hào):AC04L091/AC04L092EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(低毒)貨號(hào):AC04L098/AC04L099其他轉(zhuǎn)染產(chǎn)品EZTransPro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(GMP)貨號(hào):AC04L032/AC04L033/AC04L034EZTransRNA轉(zhuǎn)染試劑貨號(hào):AC04L051李記生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常見問題(一)Q1:李記有3款轉(zhuǎn)染試劑,這3款有什么區(qū)別?和Li**對(duì)比效果如何...
  • 細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一

    2022-10-31 細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透...
  • MH培養(yǎng)基的原理及用法

    2022-10-20 MH培養(yǎng)基為MH瓊脂培養(yǎng)基,微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫,指的是水解酪蛋白。所以MH培養(yǎng)基也成為水解酪蛋白培養(yǎng)基。常用作培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長所需的生長因子。MH培養(yǎng)基的原理:牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。MH培養(yǎng)基的成分:酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g瓊脂12gMH培養(yǎng)基的用法:稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。...
  • 介紹幾種常見的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法

    2022-09-28 細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)主要分為三大類:化學(xué)法、物理法及生物學(xué)法。但是沒有一種方法是放之四海而皆準(zhǔn)的,即沒有任何方法適用于所有細(xì)胞和所有實(shí)驗(yàn)。因而只有依據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)要求選擇理想的方法,才能獲得漂亮的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面介紹幾種常見的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法:1、DEAE-右旋糖苷法常言道:同性相斥,異性相吸。因而,當(dāng)帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸中帶負(fù)電的磷酸骨架相遇,妥妥的火花四射,而后會(huì)被細(xì)胞膜抱團(tuán)相擁并通過細(xì)胞內(nèi)吞作用迎客到家。該法可用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,操作相對(duì)簡單、結(jié)果可重復(fù),但是對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作...
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